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                異源曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備方法

                瀏覽次數(shù):890發(fā)布日期:2021-03-23

                異源曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備方法:

                1. DNA模板

                2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

                3.10×PCR Buffer

                4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

                5.Taq酶操作步驟 

                1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

                      10×PCR buffer             5μl

                      dNTP mixl                 4μl

                       引物1(10pM)               2μl

                       引物2(10PM)              2μl

                       Taq酶(2U/μl)            1μl

                      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

                      加ddH2O至               50 μl

                    視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

                2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。

                3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

                4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

                小鼠血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管生成素4(ANG-4)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管生成素2(ANG-2)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管生成素1(ANG-1)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa檢測(cè)試劑盒
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                小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)elisa檢測(cè)試劑盒
                小鼠血管活性腸肽(VIP)elisa檢測(cè)試劑盒

                 

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