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                人胃粘膜組織提取物

                • 更新時間:  2020-07-07
                • 產(chǎn)品型號:  
                • 簡單描述
                • 人胃粘膜組織提取物采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。器設備。
                詳細介紹

                細胞分類:

                一種:
                是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
                第二種:
                是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
                質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。

                胃粘膜由許多胃單位構成的,每個胃單位由頂細胞、壁細胞、主細胞、頸粘液細胞、多能干細胞以及少量的內(nèi)分等多種上皮細胞組成,其中頂細胞、壁細胞、主細胞是胃粘膜主要的三種細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人胃粘膜組織中高質量的總RNA,PCR準備的條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究
                總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

                cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質量。

                蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人胃粘膜組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

                潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。

                 產(chǎn)品名稱

                英文名稱

                貨號

                 人胃粘膜組織提取物

                Gastric: Normal Human Gastric Mucosa Derivatives

                CS-X3821

                 


                細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
                1.研究的對象是活細胞
                在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
                2.研究條件可以人為控制
                pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
                3.研究的樣本可以達到比較均一性
                通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
                4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
                采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
                培養(yǎng)步驟:
                一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
                1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
                2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
                3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
                二.細胞處理:
                1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
                2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
                對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
                1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
                2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
                3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
                4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
                3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
                以下是公司正在銷售的相關產(chǎn)品: 

                0.094ng/ml Acetylshikonin;酰紫草素生長分化因子15檢測試盒

                9.375pg/mlβ,β-Dimethylacrylshikonin;β,β-二基烯酰紫草素生長調節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子檢測試盒

                9.375pg/mlIsochlorogenic acid A;綠原A腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物檢測試盒

                23.438pg/mlGeniposide;京尼平苷/梔子苷腎損傷分子1檢測試盒

                0.094ng/mlPotassium sorbate;山梨鉀腎素前體ELISA試盒

                0.094ng/mlSenegenin;遠志皂苷元腎素檢測試盒

                0.094ng/mlLeonurine hydrochloride;鹽益母草腎上腺髓質素前體檢測試盒

                2.813ng/mlEconazole nitrate;硝益康唑腎上腺髓質素檢測試盒

                1.875ng/mlBisdemethoxycurcumin;雙去氧基姜黃素腎上腺素能a1A受體檢測試盒

                9.375pg/mlButylated Hydroxyanisole/BHA;基羥基茴香醚腎上腺素檢測試盒
                人胃粘膜組織提取物免疫球蛋白E(IgE)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鈷胺

                免疫球蛋白E(IgE)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)右旋洛芬氨三醇

                免疫球蛋白A(IgA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)右旋洛芬氨三醇(標準品)

                免疫球蛋白A(IgA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酚蘭,二苯酚藍

                免疫球蛋白A(IgA)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)植物凝膠(Sigma)

                管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)右旋洛芬

                管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)二苯基碳酰二肼(二苯胺基脲)

                管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5-磺基水楊

                巨噬細胞炎性蛋白5(MIP5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-氨基-2-萘酚-4-磺

                巨噬細胞炎性蛋白相關蛋白1(MRP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)利卡西平;10,11-二-10-羥基卡馬西平

                巨噬細胞炎性蛋白5(MIP5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)基磺酯

                性成纖維細胞生長因子(FGF2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)三七皂苷R2(S型)(標準品)

                性成纖維細胞生長因子(FGF2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)無水醋鋅

                性成纖維細胞生長因子(FGF2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)4-羥基卡唑

                組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)雌激素鹽,去表雄鈉


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